Набор для выявления антител к вирусу лейкоза птиц подгруппы J (ВЛП-J) иммуноферментным методом.
Набор «ПроФЛОК® ALV-J Ab» предназначен для проведения скриннинговых обследований поголовья с целью контроля горизонтальной передачи вируса лейкоза птиц.
Для исследования в лабораторию доставляют индивидуальные пробы сыворотки крови кур без признаков гемолиза, полученные не менее чем от 30 голов обследуемой партии с интервалом каждые 4 недели. Допускается хранение проб сыворотки крови при температуре 4°С не более 4-х дней и при температуре минус 20°С – до момента исследования. Для постановки ИФА используют: одно- и многоканальные автоматические микропипетки со сменными наконечниками разных объемов, мерную лабораторную посуду, пробирки (планшеты) для разведения образцов, дистиллированную или деионизированную воду, автоматическое (ручное) промывочное устройство (вошер), спектрофотометр (ридер) с фильтром с длиной волны 405-410 нм. Необходимо помнить, что иммуноферментный анализ является высокочувствительным методом, поэтому ошибки, связанные с чистотой лабораторной посуды, подготовкой образцов, проведением инкубационного, температурного и промывочного режимов могут быть причиной получения недостоверных результатов.
Приготовление рабочих растворов. Перед началом работы все компоненты набора выдерживают 30 мин при комнатной температуре (20-24°С).
Разведение испытуемых и контрольных сывороток. Для подготовки контрольных и испытуемых проб сыворотки крови используют чистый, несенсибилизированный антигенами планшет, в лунки которого вносят по 300 мкл буфера для разведения. Затем в лунки А2, Н10 и Н12 добавляют по 6 мкл отрицательного контроля (разведение 1:50), в остальные (кроме А1, А3 и Н11) - по 6 мкл испытуемых сывороток (разведение 1:50), используя для каждой новый наконечник. Трижды пипетируют или выдерживают 5 мин при комнатной температуре для однородного распределения антител. Подготовку положительного контроля проводят в отельных чистых пробирках объемом 5 см3, добавляя к 300 мкл буфера для разведения - 6 мкл положительной контрольной сыворотки (разведение 1:50).
Постановка реакции. Из пакета извлекают планшет, сенсибилизированный антигеном вируса лейкоза птиц подгруппы J, во все лунки которого вносят по 50 мкл буфера для разведения. Затем с помощью 8-ми или 12-ти канальной пипетки в соответствующие лунки незамедлительно переносят по 50 мкл предварительно разведенных проб (разведение 1:100). В лунки A1, A3 и H11 вносят по 50 мкл положительного контроля (разведение 1:100). Планшет накрывают крышкой и выдерживают в течение 30 минут при комнатной температуре (21-24°С), после чего лунки освобождают от содержимого резким встряхиванием и трижды промывают с помощью многоканальной пипетки или автоматического (ручного)промывочного устройства, наливая в каждую лунку по 300 мкл промывочного буфера, выдерживая по 3 минуты с периодическим покачиванием. Затем жидкость окончательно удаляют и планшет подсушивают постукиванием по сложенной в несколько слоев фильтровальной бумаге. ПРИМЕЧАНИЕ: Процедура промывания является очень важным этапом любой методики ELISA. Следует выполнять вышеописанные этапы в соответствии с приведенными инструкциями. Во все лунки планшета, используемые при постановке реакции, вносят по 100 мкл раствора субстрата, накрывают крышкой и выдерживают в течение 15 минут при комнатной температуре (21-24°С). Повторяют процедуру промывания. Во все лунки планшета, используемые при постановке реакции, вносят по 100 мкл рабочего раствора конъюгата, накрывают крышкой и выдерживают в течение 30 минут при комнатной температуре (21-24°С). Реакцию останавливают, добавляя в каждую используемую лунку по 100 мкл подготовленного стоп-раствора.
Работу с исследуемыми сыворотками необходимо проводить с соблюдением правил техники безопасности при работе с биологическим материалом. Запрещается принимать пищу и воду в помещении, где проводятся работы с использованием данного набора. При попадании химических компонентов набора на кожу или слизистые оболочки рекомендуется промывать пораженное место большим количеством водопроводной воды. Набор следует хранить в местах, недоступных для детей.
диагностический набор.
В состав набора входят иммунологические и химические компоненты.
Иммунологические компоненты:
Химические компоненты:
Криптоспоридиоз - это зооантропонозная болезнь, вызванная простейшими рода Cryptosporidium. Заболевание широко распространено по всей России и вызывает неонатальную и постнатальную диарею у телят, про... читать далее
Выращивать животных с хорошим иммунитетом — значит, обеспечить базу для успешного существования фермы. Не последнюю роль здесь играет повышение колострального иммунитета телят. Колостральный имм... читать далее
Птицеводство обеспечивает население базовыми продуктами питания: мясо бройлеров и яйцо. Именно из этих продуктов мы получаем легкоусваиваемые белки, жиры, микроэлементы и витамины. Поэтому, чем мы нак... читать далее
Из всех сельскохозяйственных животных свинья самое чувствительное животное. Скорость роста предполагает высокий уровень обмена веществ, поэтому отравление микотоксинами так характерно для этой группы ... читать далее